.
محیط کشت بلاد آگار مرک 110886
محیط کشت بلاد آگار مرک یا Blood Agar یک محیط غنی شده است که ازچندین عنصر مغذی تشکیل شده است در کل از محیط کشت بلاد آگار به عنوان ماده ای پایه و محیط رشد عمومی مورد برای تهیه آگار خون یا مکمل خون استفاده می کنند. محیط پایه می تواند Columbia Agar یا Tryptic Soy Agar باشد.
محیط کشت بلاد آگار به عبارت دیگر ماده غنی شده ای است که برای کشت آن دسته از باکتری ها یا میکروب ها استفاده می شود که به راحتی رشد نمی کنند و رشد آنها کمی سخت و دیر می باشد . این باکتریها “fastidious” نامیده می شوند چرا که در مقایسه با باکتریهای معمول نیاز به یک محیط غذایی ویژه و غنی دارند. Blood Agar برای رشد طیف وسیعی از عوامل بیماری زا بخصوص مواردی که رشد آنها دشوارتر است مانند Haemophilus influenzae ، Streptococcus pneumoniae و گونه های Neisseria مورد استفاده قرار میگیرد..با افزودن آنتی بیوتیک ، مواد شیمیایی یا رنگ ، می توان آگار خون را برای برخی عوامل بیماری زا استفاده کرد.
این محیط کشت محیط جامدی سرشار از مواد مغذی و یک محیط غیرانتخابی برای رشد و تکثیر باکتری های بیماری زایی چون هموفیلوس آنفولانزا و استرپتوکوک پنومونیه است. این محیط از ۵ تا ۱۰ در صد سلول های خونی تشکیل شده است (مثل خون گوسفند یا خرگوش). برای ساخت این محیط ابتدا به آب پپتون، عصاره قلبی، عصاره مخمر و کلرید سدیم (برای تعادل اسمزی) اضافه شده، استریل می شود. سپس خون استریل شده (به عنوان فاکتور رشد) به آن اضافه می شود. اگر استرپتوکوکی مد نظرباشد از خون خرگوش و اگر باکتری هموفیلوس پارا همولیتیکوس مدنظر باشد از خون گوسفند استفاده می شود.
طرز تهیه محیط بلاد آگار :
در ابتدا با توجه با اجزای سازنده پودر آگار مغذی (حاوی آگار، عضله قلبی، سدیم کلرید و…)، آن را به آب مقطر اضافه کنید. مخلوط را حرارت می دهیم تا پودر کاملا حل شود. ترکیب را به مدت ۱۵ دقیقه در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد اتوکلاو می کنیم. در مرحله بعد به آگار مغذی باید اجازه داده شود تا خنک شود. وقتی دمای ترکیب به ۴۵ تا ۵۰ درجه سانتی گراد رسید به اندازه ۵ درصد از وزن ترکیب، به آن خون گرم شده استریل در دمای اتاق را اضافه کرده خوب هم می زنیم. با جلوگیری از تشکیل حباب در هنگام هم زدن، محیط کشت آماده شده را استریل می کنیم. PH این محیط ها بین ۷.۲ و ۷.۶ است.
استفاده از محیط کشت بلاد آگار در همولیز :
یکی از مهمترین کاربردهای محیط کشت بلاد آگار کد 110886 مرک خون دار برای شناسایی باکتری هایی است که تولید آنزیم همولیز را انجام می دهند. در فرآیند همولیز هموگلوبین از گلبول های قرمز آزاد می شود. با تعیین مقداری از سلول های خونی که همولیز شدند باکتری ها از هم تفکیک می شوند.
توجه :
قبل از اضافه کردن خون به محیط آگار خون را دفیبرینه می کنند و فیبرین آن را خارج می کنند. چون وجود فیبرین در خون باعث لخته شدن آن می شود و تشخیص واکنش های همولیتیک را با اشکال مواجه می کند.
سه نوع همولیز آلفا، بتا و گاما داریم. در همولیز آلفا رنگ سبزی اطراف کلونی باکتری رشد کرده، تشکیل می شود و این نوع همولیز تجزیه جزئی هموگلوبین گلبول های قرمز را نشان می دهد. این همولیز خصوصیت جدا کننده باکتری استرپتوکوک به نام پنومونیه است.
در همولیز بتا اطراف کلونی باکتری به صورت شفاف قابل مشاهده است و تجزیه هموگلوبین گلبول های قرمز به طور کامل انجام می شود. این همولیز مربوط به باکتری استرپتوکوک پیوژنس است.
در همولیز گاما، در واقع هیچ همولیزی وجود ندارد. در این نوع همولیز محیط بلاد آگار به رنگ قهوه ای دیده می شود. این نوع همولیز مربوط به باکتری انتروکوکوس فکالیس می باشد.
۴۰ گرم از پودر در یک لیتر آب مقطربه طور کامل حل شود.
آن را حرارت داده و اجازه دهید به مدت یک دقیقه بجوشد تا کاملا پودر حل شود.
به مدت ۱۵ دقیقه در ۱۲۱ درجه سانتی گراد اتوکلاو شود.
اجازه دهید تا دمای ۴۵-۵۰ درجه خنک شود و سپس به صورت آسپتیکال خون ۵% استریل و دفیبرینه به آن اضافه شود.
از کشت های مشخص و استاندارد جهت کنترل استفاده کنید.
نگهداری
این محیط صرفا برای آزمایشگاه است و باید درب قوطی کاملا بسته باشد. از تابش شدید آفتاب جلوگیری شود، در محیط خشک و خنک و رطوبت کمتر از ۶۰% قرار گیرد.
محیط کشت بلاد آگار بیس محیط کشت Blood Agar Base این محیط برای جداسازی، کشت و تشخیص فعالیت های همولیتیک استرپتوکوک ها و سایر میکرو ارگانیسم ها مورد استفاده قرار می گیرد. این محیط با داشتن عضله قلبی، پپتون کازئین و عصاره مخمر باعث تامین نیتروژن، کربن، اسید های آمینه و ویتامین ها می شود و همچنین حاوی کلرید سدیم برای تعادل اسمزی و آگار جهت جامد کردن محیط است. خون نیز در این محیط به عنوان فاکتور رشد برای باکتری های سخت رشد استفاده می شود و مبنای تعیین واکنش های همولیتیک است. الگو های همولیتیک ممکن است با توجه به منبع خون حیوانی یا نوع محیط پایه مورد استفاده متفاوت باشد.
محیط مناسبی برای کشت باکتری هایی مانند هموفیلوس آنفولانزا،گونه های نایسریا و استرپتو مونیه است.
حاوی ۵ الی ۱۰ درصدسلول های خونی پستانداران (معمولا اسب و گوسفند)در محیط پایه است.
علاوه برآن،شامل کازئین،پاپایا،سدیم کلراید،پپتون و آب مقطر درPH7.3+0.2 است.
این نوع محیط کشت برای جداسازی و شناسایی حساسیت ضد میکروبی استرپتوکوک ها مورد استفاده قرار می گیرد.
خواص همولیز باکتری ها بر اساس بلاد آگار قابلیت اندازه گیری و بررسی است.
همولیز به تجزیه خون گفته می شود.
برخی میکرو ارگانیسم ها اگزو آنزیم آزاد کرده که باعث لیزشدن گلبول های قرمز و آزاد شدن هموگلوبین می شوند.همولیز به سه نوع آلفا همولیز و بتا همولیز و گاما همولیز شناخته می شود.در آلفا همولیز تنها بخشی از سلول های قرمز خونی همولیز شده و در اثر تبدیل مت هموگلوبین به هموگلوبین به رنگ سبز ویا قهوه ای دیده می شود.در بتا همولیز،گلبول های قرمز به طور کامل تجزیه شده و از بین می روندو اطراف محل رشد باکتری به رنگ روشن درمی آید.در صورتی که میکرو ارگانیسم نتواند گلبول های قرمز را لیز کرده و همولیز ایجاد نشود.به آن گاما هموایز گفته می شود.
طرز تهیه محیط بلاد آگار کد 110886 مرک
۲۸ گرم پودر آگار مغذی را در یک لیتر آب مقطر مخلوط کنید.
به مخلوط حرارت داده تا به طور کامل اجزا حل شوند.
ترکیب بدست آمده را در دمای ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه اتو کلاو کنید
سپس اجازه دهید آگار مغذی خنک شود.
هنگامی که به دمای ۴۵ الی ۵۰ درجه سانتیگراد رسید، ۵ درصد وزنی خون استریل شده و گرم شده تا دمای اطاق به مخلوط اضافه و به خوبی میکس شود.
مراقب باشید حباب هوا تولید نشود.
در نهایت، محیط کشت بلاد آگار را به صفحات استریل منتقل کنید.
نقد و بررسی‌ها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.